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碱性磷酸酶-PAS染色液不仅能够显示碱性磷酸酶活性位点和糖原等物质，亦能区分二者，冰冻切片及石蜡切片均可。

• 蒸馏水、二甲苯或环保脱蜡透明液、甘油明胶
  
• 温箱或水浴锅、染色缸

• 该染色液适用于冰冻切片、石蜡切片；染色过程中注意控制高碘酸处理的时间，否则容易褪色。
  
• 碱性磷酸酶显色后，经高碘酸应特别小心，严格控制时间，否则褪色。
  
• ALP孵育液、ALP硫化液易失效，最好分成小份储存，一经开启立即使用。
  
• ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。
  
• 对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
  
• 组织在石蜡包埋时，温度不宜高于56℃。应使用熔点为52～54℃的石蜡进行浸蜡，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。
  
• 不纯的二甲苯会分解黑色沉淀，宜选用AR级以上的二甲苯。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 石蜡切片二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至蒸馏水，冰冻切片直接入水。
  
• 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2～5min。
  
• 切片入ALP孵育液(阴性对照切片入ALP对照液)，置于37℃温箱；冰冻切片孵育5～15min，石蜡切片孵育2～12h；流水洗2min后入蒸馏水。
  
• 入硝酸钴溶液，置于37℃温箱染色5min，流水洗5min后入蒸馏水。
  
• 上述过程中配制ALP硫化工作液，即取ALP硫化溶液用蒸馏水稀释50倍，即为ALP硫化工作液，即配即用；切片入硫化工作液，孵育2min。
  
• 流水洗10min后入蒸馏水。
  
• 入高碘酸溶液室温氧化2～5min。蒸馏水换洗3次。
  
• 入Schiff试剂置于37℃温箱染色10～30min。
  
• 按亚硫酸溶液:蒸馏水=3:1的比例配制亚硫酸工作液，清洗3次，每次2min，入蒸馏水。
  
• 冰冻切片直接用甘油明胶封片；石蜡切片脱水，常规二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封片。

• ALP对照液为不含底物的孵育液。取相同的切片入ALP对照液，其余同上。结果为阴性。
  
• 备选方案：切片进入ALP孵育液前，可先经碘液和5%硫代硫酸钠溶液各3min，充分水洗后再进行孵育等步骤，可用此法作阴性对照。